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NEWSEVO视讯人红系白血病细胞TF-1使用指南
来源:邱伦睿 日期:2025-03-05### 人红系白血病细胞TF-1
#### 产品介绍
人红系白血病细胞TF-1是研究血液疾病的重要细胞系,广泛应用于生物医学研究中。本细胞系具有良好的生长特性,适合悬浮培养。
#### 生长特性
TF-1细胞系以悬浮状态生长,细胞形态呈圆形。冻存条件为无血清冻存液,推荐的培养体系为1640培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和2ng/ml的GM-CSF,以及1%的双抗(抗生素)。
#### 传代方法
初次传代建议按照1:2的比例进行。一般情况下,每2~3天更换培养液或进行传代。需要注意的是,悬浮细胞在换液时应通过离心收集,切勿直接倒掉培养液。可以使用无菌离心管收集细胞,以确保操作的无菌性。
如有对比培养的需求,建议额外购买我们的EVO视讯完全培养基进行实验,以确保最佳培育效果。
#### 细胞处理说明
收到细胞后,务必将其培养至良好状态,再用完全培养液灌满细胞瓶并封紧瓶口。这是运输细胞的最佳方法。收到细胞后,需用75%酒精对整瓶细胞进行消毒,然后在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶置于37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。
微观观察细胞生长情况后,建议在不同倍数下拍照保存(推荐40x、100x、200x各一张)。前三天的照片将作为重要的售后依据,若未提供照片,默认细胞状态良好。
在传代之后,最好使用原瓶的完全培养基对一瓶细胞进行培养,同时可用自己配制的完全培养基对另一瓶细胞进行对比培养。这有助于掌握细胞生长和适应情况。
#### 细胞传代步骤
当细胞未超过80%汇合度时,应将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱中培养;如细胞密度超过80%,则可进行传代。具体步骤如下:
1. **悬浮细胞传代:**
- 方法一:收集细胞,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后,吹匀细胞悬液,按1:2到1:5的比例分配至新的培养皿或瓶中。
- 方法二:采用半数换液的方式,弃去一半培养基后将余下细胞悬起,然后按1:2到1:3的比例分配至新的培养皿或瓶中。
2. **细胞冻存:**
1. 细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,收集悬液至离心管,并在1000rpm下离心5分钟。
2. 弃去上清,加入1ml雅吉生物无血清冻存液(C7001),混匀后装入冻存管。每支冻存管加入1ml冻存液即可。
3. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱内保存,如需转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱存放超过24小时。
3. **细胞复苏:**
1. 从液氮中取出冻存管(注意佩戴防护面具),迅速将其置入37℃水浴中解冻,直到冻存管内无结晶,然后用75%酒精擦拭冻存管外壁。
2. 将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清液,加入5ml完全培养基重悬细胞,将其接种至T25培养瓶中,放置在37℃、5%CO2培养箱中培养。
4. 次日更换新鲜完全培养基,继续培养细胞。
#### 售后服务政策
1. **细胞出现问题,可重发的情况及判定标准:**
- 运输过程中如出现细胞丢失、瓶身破损、培养液严重泄漏等情况,将提供重发服务。
- 若收到产品48小时内发现细胞污染问题,需提供真实实验结果,经核实后将重新发货。
- 常温发货的细胞,如收到后24小时内细胞未存活(须提供真实清晰的细胞状态照片),将提供重发服务。
- 细胞活性问题请在收到产品7天内反馈,并用台盼蓝染色法验证,核实后重发。
- 收到细胞当天及第2、3天需拍照,3天未告知的视为产品合格。
- 4-7天内问题的补救需提供收到细胞前3天的照片,以及出现问题时的照片和相关操作步骤,经过技术人员沟通确认后可进行重发。
2. **细胞出现问题,不予以重发的情况:**
- 客户自行造成的细胞污染,不予重发。
- 客户因不当操作导致细胞状态不良,不予重发。
- 使用非本库推荐的细胞培养体系导致的细胞状态不佳,不予重发。
- 若未提供细胞培养前3天的照片,则不予重发。
- 对细胞进行其它处理之后的状态不佳,亦不予重发。
- 收到细胞后2天内未告知的,亦不予重发。
- 根据具体情况进行判断。
在使用EVO视讯的人红系白血病细胞TF-1时,确保遵循上述细胞培养和管理规范,以保证实验的成功和细胞的健康。我们的技术支持团队将竭诚为您提供帮助与解决方案。
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